產品貨號：CR2626-0.5MGX2支/1MGX5支

產品名稱：HRP快速標記試劑盒（少量可標記0.1mg）

原理與應用：高碘酸鈉氧化法活化辣根過氧化物酶（HRP）的糖基，經過活化的HRP帶有醛基可以與待標記物的游離氨基結合，發(fā)生希夫堿反應（Schiff's base reaction）。本試劑盒適用于帶有游離氨基的物質的標記，比如：帶有游離氨基（伯胺）的抗體、蛋白或者小分子化合物。本試劑盒采用特有穩(wěn)定技術，活化HRP保存在液體中，吸取方便，少量可以標記100ug，讓您的標記工作更易把控和操作！

試劑盒組成：

操作步驟：

1.  先去除待標記抗體或蛋白中的疊氮鈉、以及含有氨基的緩沖成分物質，比如甘氨酸、Tris 等，還有EDTA等物質，可采用透析和超濾的辦法置換緩沖液，以去除干擾物質達到好的標記效果！透析或超濾緩沖液選0.01M CB,PH:9.6緩沖液(說明書附件有經驗配方無需調整PH），若實驗室沒有碳酸鹽試劑再采用0.01M PBS（PH:7.0-7.4均可）透析或超濾置換緩沖液，調整抗體或蛋白的濃度到2MG/ML。如果抗體和蛋白不含上述這些干擾物質可以直接用上述PBS或CB緩沖液調整濃度到2MG/ML備用。

2.  從4℃取出HRP標記試劑盒，使各組分充分混勻。

3. 取500ul抗體或蛋白（約1mg），加入50ul預活化HRP(1mg)液體中，用移液槍反復吹打幾次混勻，混勻后加入HRP標記啟動液99ul（加入啟動液量依據(jù)：每10ul蛋白和HRP混合液加1.8ul啟動液）繼續(xù)混勻數(shù)次，避免產生氣泡。然后避光30℃-37℃溫箱偶聯(lián)反應2-3小時，若遇快要下班也可放4℃反應24小時左右（此法效果一樣或者更好不必擔心）。

4. 偶聯(lián)結束將反應終止液粉管中加入1mL去離子水混勻，取50ul加入3所述反應液中（加入終止液量依據(jù)：每1mg HRP加入終止液50ul），充分混勻，室溫放置1 小時或者4℃ 2小時。

5. 終止完成后，可直接加入等體積的標記物保存液，充分混勻，置于-20℃保存。如果想更上長期的保存建議先用0.067M PBS  PH:7.0（說明書附件有經驗配方）透析或超濾置換緩沖液后再加標記物保存液。這樣可以保存3年左右甚至更長。