影響酶催化作用的因素主要有以下幾個(gè)方面：
一、底物濃度
在底物濃度較低時(shí)，反應(yīng)速度隨底物濃度的增加而急劇上升，兩者呈正比關(guān)系。隨著底物濃度的進(jìn)一步增高，反應(yīng)速度不再成正比例增加，反應(yīng)速度增加的幅度不斷下降。如果繼續(xù)增加底物濃度，反應(yīng)速度將不再增加，表現(xiàn)出零級(jí)反應(yīng)，此時(shí)酶的活性中心已被底物飽和。
二、酶濃度
在底物濃度足夠高的條件下，酶促反應(yīng)速度與酶濃度成正比。
三、溫度
一般來(lái)說(shuō)，在一定溫度范圍內(nèi)，隨著溫度的升高，酶促反應(yīng)速度加快。因?yàn)闇囟壬呖墒狗肿舆\(yùn)動(dòng)加快，從而增加了分子間的碰撞頻率，使酶促反應(yīng)的活化分子數(shù)增多。
但當(dāng)溫度升高到一定限度時(shí)，酶的熱變性開(kāi)始發(fā)生，導(dǎo)致酶活性下降甚至完全喪失。通常，酶促反應(yīng)的最適溫度是在一定條件下，酶活性最高時(shí)的溫度。不同的酶最適溫度不同。
四、pH
每一種酶只能在一定的pH范圍內(nèi)表現(xiàn)出活性，在某一pH下酶活性最高，這個(gè)pH稱(chēng)為該酶的最適pH。
pH對(duì)酶活性的影響主要是影響酶活性中心的某些必需基團(tuán)、輔酶及許多底物的解離狀態(tài)。在過(guò)酸或過(guò)堿的環(huán)境下，酶的空間結(jié)構(gòu)被破壞，導(dǎo)致酶活性喪失。
五、抑制劑
抑制劑能使酶的催化活性下降，但不引起酶蛋白變性。根據(jù)抑制劑與酶結(jié)合的緊密程度不同，可分為可逆性抑制劑和不可逆性抑制劑。
可逆性抑制劑與酶以非共價(jià)鍵結(jié)合，可用透析等物理方法除去抑制劑使酶恢復(fù)活性。
不可逆性抑制劑與酶以共價(jià)鍵結(jié)合，不能用透析等方法除去抑制劑使酶恢復(fù)活性。
不同的抑制劑作用機(jī)制不同，有的抑制劑與底物競(jìng)爭(zhēng)酶的活性中心，從而阻礙底物與酶的結(jié)合，稱(chēng)為競(jìng)爭(zhēng)性抑制；有的抑制劑與酶活性中心以外的基團(tuán)結(jié)合，使酶的構(gòu)象改變而不能與底物結(jié)合，稱(chēng)為非競(jìng)爭(zhēng)性抑制。
六、激活劑
激活劑能提高酶的活性。激活劑大多為金屬離子，如鎂離子、鉀離子、錳離子等，也有一些小分子有機(jī)化合物。
激活劑的作用機(jī)制可能是與酶結(jié)合，改變酶的構(gòu)象，從而使酶更易于與底物結(jié)合或提高酶的催化活性。
